Develop methods to analyse and differentiate somatic cells in goat milk by use of flow cytometry

Produksjonen av geitemelk har lange og sterke tradisjoner i Norge, og gir kulturelt viktige produkter som brunost, men tilbyr underutnyttede produkter som løpe og syre
koagulerte oster. Slik produksjon har imidlertid sine utfordringer, og spesielt høysomatisk celletall (SCC) er sterkt assosiert med bakterieinnhold og biologiske faktorer som kan forstyrre kvaliteten på melken og osten. Videre utnytter geiteoppdrett bioøkonomiske ressurser i områder hvor forholdene for kumelkproduksjon er dårligere, men uvanlig høy SCC på norsk geiter tyder på en for hyppig tilstedeværelse av subkliniske jurinfeksjoner. Foruten viktigheten av dyrevelferd, vil jur-infeksjoner i verste fall trenge antibiotikabehandling. 

Mål: Utvikle metoder for å analysere og differensiere somatiske celler i geitemelk ved bruk av flyt cytometri.

Forventede resultater: Etablere et metodisk grunnlag for et forskningsprosjekt som tar sikte på karakterisere leukocyttundertypene i norsk geitemelk, for å studere deres assosiasjoner med produktkvalitet så vel som dyrehelse, med potensiell bruk som prediktive indikatorer komplementær til somatisk celletall.

Somatisk celletall (SCC) er uvanlig høyt i norsk geitemelk, av ukjente grunner. Ensidig måling av SCC forteller lite om bakenforliggende årsaker. Flowcytometri kan avsløre spesifikke undergrupper av celler, blant annet for å avsløre om skjult (subklinisk) jurbetennelse kan ligge bak. Tidligere forsøk med flowcytometri i melk har vist seg utfordrende. Dette prosjektet har hatt som mål å etablere  flowcytometriske metoder til analyser av melkeprøver fra norske geiter.

Vi har i forprosjektet etablert protokoller for isolering av celler fra geitemelk og flowcytometriske analyser av disse. En rekke reagenser og fargingsstrategier har vært prøvd ut. Melk og blodprøver fra både ku og geit har inngått i etableringen. Vi har vektlagt identifisering av levende celler for å eliminere en viktig feilkilde, samt DNA innhold i cellene. Prosjektet har ledet til et kombinert panel egnet til å  undersøke for de mest relevante parameterne, som omfatter granulocytter (knyttet til bakteriell jurbetennelse), makrofager/monocytter, lymfocytter og DNA-frie cytoplasmatiske legemer fra epitel (en mistenkt kilde til høyt SCC i ellers friske dyr).

I tillegg er det søkt og innvilget et større NFR-prosjekt for å kartlegge SCC i norske geiter. Metodene og protokollene fra forprosjektet brukes direkte inn i viktige deler av dette hovedprosjektet. Målet er bedre kunnskap om bakenforliggende årsaker til høyt SCC. Basert på denne kunnskapen vil vi søke å forstå om faktorer av helsemessig betydning ligger bak høyt SCC, av stor betydning for produsentenes og meierienes videre beslutninger. Avhengig av funn vil det også kunne åpne seg muligheter for mer raffinerte overvåkningsmetoder av norsk geitemelk.